膽汁酸定量分析
Bile Acids Quantitative Analysis
膽汁酸概述
膽汁酸(bileacid)是一大類膽烷酸的總稱,在脂肪代謝中起著重要作用。膽汁酸的生理功能可概括為:影響膽汁分泌、促進腸道對脂類物質的吸收并影響腸道功能。膽汁酸作為消化液的組成部分之一是由肝合成并隨膽汁排入腸內,促進對脂類物質的消化和吸收。主要包括膽酸、鵝去氧膽酸、脫氧膽酸、石膽酸、熊去氧膽酸等及其甘氨酸和牛磺酸結合型。肝分泌到膽汁中的膽汁鹽是強有力的乳化劑,膽汁流經小腸上部后,膽汁鹽乳化脂肪,助其消化吸收。在乳化脂肪小滴的脂肪酸和甘油酯被小腸下部吸收以后,膽汁鹽也被重吸收。它們回到肝并被重新使用,因此,膽汁鹽總在肝和小腸間循環。腸道中大量的微生物會對這種肝腸循環產生影響。主要的影響菌類有乳酸菌、雙歧桿菌、腸桿菌、擬桿菌和梭狀芽孢桿菌。這些菌通過影響宿主膽汁酸的種類和含量,進而對諸如膳食脂肪和脂溶性維生素的吸收,促進脂質吸收,保持腸道屏障功能,信號系統內分泌功能,并能夠在一定程度上調節甘油三脂、膽固醇、葡萄糖和能源體內平衡。
我們采用LC-MS/MS技術平臺可對40種膽汁酸絕對定性定量分析,確保多種同分異構體獲得較好的分離,并采用具有代表性的同位素膽汁酸作為內標校正,顯著提高定性定量檢測的準確性。本方法具有優異的靈敏度、精密度、重復性及準確性,可用于探索膽汁酸在各種疾病中的病因學、發病機理中所發揮的作用,挖掘其在疾病診斷、治療及預后過程中的重要價值。目前完成樣本數量為800+。
檢測列表
案例解析
組織和血清代謝物分析揭示了人類肝癌的潛在生物標志物
研究目的:肝細胞癌(HCC)是一種異質性代謝紊亂的惡性腫瘤,缺乏有效的生物標志物進行監測和診斷。本研究我們使用組織和血清代謝組學方法尋找肝癌潛在的代謝物生物標志物。
方法:選取肝癌患者的肝組織樣本和90個血清樣本(30個HCC患者、30個肝硬化患者、30個健康樣本),采用LC-MS進行單因素和多因素分析。
結論
1.肝細胞癌組織和血清標本中共檢出六種代謝物,分別chenodeoxycholic acid (CDCA), glycocholic acid (GCA), LPC20:5, LPE18:0, succinyladenosine and uridine。
2.采用CDCA、LPC20:5、succinyladenosine和uridine建立基于logistic回歸的診斷模型。四代謝物物將肝癌(HCC)與肝硬化區分開來,AUC評分為0.938,敏感性為93.3%,特異性為86.7%。說明CDCA、LPC20:5、succinyladenosine、uridine聯合應用可作為提高HCC敏感性和特異性的生物標志物。
參考文獻:Jun Hana, Wen-xingQin,et al. Tissue and serum metabolite profiling reveals potential biomarkers ofhuman hepatocellular carcinoma[J].ClinicaChimica Acta,2019,488:68-75.
技術優勢
特異性:適宜的樣本前處理方法,充分提取樣本中膽汁酸物質;
定性定量準:構建標品數據庫,每個物質選擇合適的離子對進行定量檢測,確保定性定量準確。
技術參數
檢測平臺:AB Sciex 6500+ 、4000 LC-MS/MS
樣本類型及需求量:血清、血漿≥20ul
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 動物及臨床組織樣本≥20mg
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 糞便≥20mg
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 膽汁酸≥20ul
樣本的保存:液氮或-80℃保存